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BSP甲基化测序
亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是检测基因甲基化的经典方法,其原理为:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变。
基因组DNA经亚硫酸盐处理后,设计BSP引物扩增目的片段,此时尿嘧啶(U)全部转化为胸腺嘧啶(T),最后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生甲基化。
技术优势
(1) 检测序列长,可长达200-400bp
(2) 分辨率高,可检测到每一个碱基的甲基化状况
(3) 对于样品要求低,适用于新鲜、冷冻和FFPE样本
服务内容
1. 基因组DNA的Bisulfite转化;
2. BSP(Bisulfite Sequencing PCR)法,包括引物设计与合成,TA克隆测序及数据分析。
样品要求
(1) 若提供基因组DNA,需≥2μg
(2) 若提供的材料为新鲜组织、血液、细胞等生物材料,请提供足够提取2μg以上基因DNA的材料量
(3) 基于所选择的DNA甲基化检测方法,请提供相应的引物或引物序列
BSP服务完成时提供
(1) Bisulfite处理的基因组DNA
(2) 实验报告(包括BSP产物的直接测序报告)
(3) 5个有效的阳性克隆
(4) 空点图
结果展示
BSP测序图
BSP点状图和BSP序列比对
BSP柱状图