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腺病毒
来源：万物 发布时间：2021-08-31
腺病毒质粒系统概述
腺病毒是一类中等大小、无包膜的双链DNA病毒，已知可导致人类轻度至重度呼吸道疾病。腺病毒在研究中的优势包括它们的大包装容量(>8 kb)、高滴度和高水平的转基因表达。此外，这些病毒能够以几乎100%的效率靶向广泛的分裂和非分裂细胞类型。不像慢病毒某人逆转录酶病毒，腺病毒不会整合到宿主基因组中。腺病毒的缺点包括短暂的转基因表达，以及由病毒衣壳诱导的实质性免疫反应。
腺病毒可以通过几种方法产生，其中最常见的涉及腺病毒质粒在哺乳动物细胞或微生物(包括细菌和酵母)中的同源重组。两个质粒，称为穿梭质粒和腺病毒(也称为骨架)质粒，被重组到一个包含两个质粒序列的DNA分子中。然后可以将这种DNA分子转染到哺乳动物包装细胞系中，产生腺病毒颗粒。。
腺病毒成分
腺病毒基因组是一个线性的36Kb双链DNA (dsDNA)分子，包含多个重剪接转录物。基因组的两端是我已转换terminal repeats (ITRs)。基因分为早期(E1-4)和晚期(L1-5)转录本。有57种可接受的人腺病毒类型，大多数腺病毒载体基于Ad5。基于Ad5的载体使用柯萨奇-腺病毒受体(CAR)进入细胞。
重组腺病毒删除了两个基因:E1和E3。E1由腺病毒包装线293或911；它从病毒载体中的缺失使病毒复制能力下降。E3参与逃避宿主免疫，并不是病毒产生的关键。这两个成分的缺失导致转基因包装容量为>8 Kb。构建体包含左右臂，以促进转基因同源重组到腺病毒质粒中。
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