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产品详情
操作说明
注意事项
产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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DNase I (RNase Free) |
M0k942138 |
200U |
产品描述
DNase I（Deoxyribonuclease I，脱氧核糖核酸酶 I）是一种核酸内切酶，可以将单链、双链DNA降解为5'-磷酸、3'-羟基末端的单脱氧核苷酸或者寡核苷酸；DNase I的活性依赖钙离子，能够被镁离子和二价锰离子激活；镁离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。
主要用途：制备不含DNA的RNA样品；
RT-PCR反应前RNA样品中基因组DNA残留去除；
体外T7，T3，SP6等RNA Polymerases催化的RNA转录后体系中DNA模板去除；
缺口平移（nick translationin）DNA标记；
产生DNA随机片段文库；
细胞凋亡Tunel检测中部分剪切基因组DNA作为实验阳性对照等。
特点：特异性降解DNA，不降解RNA。
酶活性定义：在37℃孵育10 min将1 µg pBR322载体DNA全部降解所需酶量定义为一个酶活单位。
失活或抑制：加入EDTA后，65℃加热10 min可使DNase I充分失活，酚LF抽提也可使DNase I失活。
纯度：SDS-PAGE检测纯度≥95%，无RNase，1 U/μL。
酶储存缓冲液：10 mM Tris-HCl，2 mM CaCl2，50% Glycerol，pH 7.6。
10×DNase I Reaction Buffer：100 mM Tris-HCl，25 mM MgCl2，5 mM CaCl2，pH 7.6。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；-20℃保存，有效期12个月。
组成
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Component Number |
Component |
G3342-200U |
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G3342-1 |
DNase I (RNase free) |
200 U |
|
G3342-2 |
10×DNase I Reaction Buffer |
1 mL |
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G3342-3 |
25 mM EDTA |
250 μL |
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产品说明书 |
1份 | |
参考使用
1. 参考反应体系：
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RNA样品 |
1 μg |
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DNase I |
1 U |
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10×DNase I Reaction Buffer |
1 μL |
|
RNase free Water |
To 10 μL |
2. 配制反应完成后，轻轻混匀，随后将液体离心至管底；
3. 37℃孵育30 min，反应完后在反应体系中加入1 μL 25 mM EDTA终止反应；
4. 65℃孵育10 min使DNase I完全失活。
注意事项
1. 使用该产品时应将酶置于冰盒或冰浴中，使用完毕后立即于-20℃保存。
2. DNase I反应体系可参考实验需求以及实际应用产品相应使用说明调整。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
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