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  • 原代细胞的复苏步骤
    原代细胞的复苏步骤
    细胞一般储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。 细胞复苏就是要把原本冷冻保存(冻存)着的细胞恢复到一般的生长状态,今天我们来看看原代细胞的复苏步骤。
    2020-12-10
  • 原代细胞培养过程中的常见问题
    原代细胞培养过程中的常见问题
    根据传统定义,自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞直接从组织分......
    2020-08-21
  • 原代细胞的培养方法
    原代细胞的培养方法
    原代细胞最接近和最能反映体内生长特性,适宜用于药物敏感性试验、细胞分化等实验研究。 原代细胞的培养,也叫初代培养,是从供体取得组织细胞在体外进行的首次培养,是建立细胞系的第一步,是一项基本技术。
    2020-10-09
  • Western免疫印迹(Western Blot)
    Western免疫印迹(Western Blot)
    Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。
    2021-08-31
  • CRISPR/Cas9基因敲除
    CRISPR/Cas9基因敲除
    CRISPR(clustered,regularlyinterspaced,shortpalindromicrepeats)是一种来自细菌降解 入侵的病毒DNA或其他外源DNA的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作......
    2021-08-31
  • 双荧光素酶报告基因检测
    双荧光素酶报告基因检测
    全基因合成miR潜在结合位点上下游~500bp(LncRNA、circRNA或mRNA的3’UTR)野生形式WT及结合位点的突变形式Mut,克隆到psiCHECK-2多克隆位点处(1640-1674)(图1),然后与miR的mimics/NC共同转染293T细胞测定荧光素酶读值即可。
    2021-08-31
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