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考马斯亮蓝G250

优惠价 125.00
价格 ¥0.00
货号:
S0921K47
产品规格:
250ml
购买数量:
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产品详情 操作说明 注意事项

产品简介

考马斯亮蓝G250能与蛋白质快速结合。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色,最大光吸收在488 nm,其与蛋白质结合后在595 nm处有最大吸收值,并且光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白质的定量检测。


储存与运输

常温保存与运输,有效期12个月。


使用方法

1. (可选)绘制标准曲线(酶标仪法):将BSA用水溶解配制0.5 mg/mL的蛋白标准工作液。将蛋白标准工作液分别按0,1,2,4,8,12,16,20 μL加到96孔板中,然后用PBS或生理盐水依次加20,19,18,16,12,8,4,0 μL将上述梯度工作液补足到20 μL。得到蛋白浓度依次为0,25,50,100,200,300,400,500 μg/mL的梯度曲线。如只是做相对定量比较,则无需绘制标准曲线。

2. 准备待测样品:将待测的蛋白样品进行适当稀释(可通过预实验检测,使样品蛋白浓度在标准曲线范围内,确保检测结果可信),按照每个样品20 μL的量加到96孔板中。待测样品稀释需与蛋白标准品用相同溶液。

3. 检测:向以上每孔加入200 μL考马斯亮蓝G250溶液充分混匀(可将96孔板放在振荡器上振荡30 s),室温放置3-5 min后,以标准曲线0号做参比,在595 nm波长下比色测定,记录各孔吸光度值。

4. 计算:以标准曲线中梯度蛋白含量(μg/mL)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。根据所测样品的吸光值,在标准曲线上即可查得相应孔中待测样品的蛋白浓度(μg/mL),再乘以样品稀释倍数即为待测样品实际蛋白浓度。

另:如用分光光度计测定,则用玻璃试管或玻璃比色管为反应容器制作标准曲线。待测蛋白样品做适当稀释后,加入到新的玻璃试管或比色管中,样品量为1 mL。向标准曲线梯度管及样品管中各加入考马斯亮蓝G250溶液3 mL,充分混匀,室温静置3-5 min后用分光光度计进行比色检测。

检测时分光光度计波长设置595 nm,以标准曲线0号管为参比调零,检测标准曲线及待测样品。按照步骤4的方法绘制标准曲线及计算待测样品中的蛋白浓度。


注意事项

1. 本产品使用前需恢复至室温,并颠倒混匀,以免影响检测的灵敏度。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

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