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产品详情
操作说明
注意事项
产品简介
考马斯亮蓝G250能与蛋白质快速结合。考马斯亮蓝G250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488 nm，其与蛋白质结合后在595 nm处有最大吸收值，并且光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量检测。
储存与运输
常温保存与运输，有效期12个月。
使用方法
1. （可选）绘制标准曲线（酶标仪法）：将BSA用水溶解配制0.5 mg/mL的蛋白标准工作液。将蛋白标准工作液分别按0，1，2，4，8，12，16，20 μL加到96孔板中，然后用PBS或生理盐水依次加20，19，18，16，12，8，4，0 μL将上述梯度工作液补足到20 μL。得到蛋白浓度依次为0，25，50，100，200，300，400，500 μg/mL的梯度曲线。如只是做相对定量比较，则无需绘制标准曲线。
2. 准备待测样品：将待测的蛋白样品进行适当稀释（可通过预实验检测，使样品蛋白浓度在标准曲线范围内，确保检测结果可信），按照每个样品20 μL的量加到96孔板中。待测样品稀释需与蛋白标准品用相同溶液。
3. 检测：向以上每孔加入200 μL考马斯亮蓝G250溶液充分混匀（可将96孔板放在振荡器上振荡30 s），室温放置3-5 min后，以标准曲线0号做参比，在595 nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。
4. 计算：以标准曲线中梯度蛋白含量（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。根据所测样品的吸光值，在标准曲线上即可查得相应孔中待测样品的蛋白浓度（μg/mL），再乘以样品稀释倍数即为待测样品实际蛋白浓度。
另：如用分光光度计测定，则用玻璃试管或玻璃比色管为反应容器制作标准曲线。待测蛋白样品做适当稀释后，加入到新的玻璃试管或比色管中，样品量为1 mL。向标准曲线梯度管及样品管中各加入考马斯亮蓝G250溶液3 mL，充分混匀，室温静置3-5 min后用分光光度计进行比色检测。
检测时分光光度计波长设置595 nm，以标准曲线0号管为参比调零，检测标准曲线及待测样品。按照步骤4的方法绘制标准曲线及计算待测样品中的蛋白浓度。
注意事项
1. 本产品使用前需恢复至室温，并颠倒混匀，以免影响检测的灵敏度。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
凡合肥万物生物科技有限公司销售的产品均有严格的质量保证。如发现产品存在包装规格疑问，请于收货之日起七日内向我公司总部或当地办事处提出，并请保证该产品，以备本公司进行核对检验。如果发现有质量问题，请于收货后一月内保留产品50%以上的量，以便本公司回收产品进行质检，确认产品质量。如逾期，则视为已经对本公司产品进行验收。 声明：如发生产品索赔事宜，本公司仅在产品价格范围内酌情赔偿，恕不接受超出产品价格范围之赔偿。客户在使用过程中有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话我们随时给予解答。
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