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G-418

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货号:
FKU0147
产品规格:
1g
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产品详情 操作说明 注意事项

产品简介

G-418(Geneticin,遗传霉素),也称为G418,是一种氨基糖苷类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似。G-418能通过抑制转座子Tn601,Tn5的基因表达,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性。

在分子遗传实验中,G-418是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。当neo基因被整合进真核细胞DNA后,能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G-418的选择性培养基中生长。G-418的这一选择特性,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。


主要参数

分子式:C20H40N4O10·2H2SO4

分子量:692.7

性状:白色或灰色粉末

溶解性:易溶于水


储存与运输

冰袋(wet ice)运输,-20℃保存,有效期24个月。


使用说明

可用PBS缓冲液(推荐G4202)溶解本产品,配制50 mg/mL或其他浓度的储存液,过滤除菌后分装成小份置于-20℃保存。临用前融化均匀后稀释至所需浓度。溶液避免反复冻融。

筛选哺乳动物细胞,推荐起始筛选浓度为400 μg/mL。筛选植物细胞,推荐起始筛选浓度为10 μg/mL。筛选酵母,推荐起始浓度为500 μg/mL。建议根据具体筛选材料及起始浓度作用效果进行调整,确定最佳筛选浓度。

以筛选哺乳动物细胞为例,将细胞制成悬液稀释至1000个细胞/mL,取100μL细胞悬液加入含培养基的24孔板中,将每孔中G-418终浓度调整至0,100,200,300,400,500,600,700,800,900,1000μg/mL等梯度,每3-5天更换含G-418的筛选液,培养10-14天,以使全部细胞死亡的最低G-418浓度进行下一步筛选。此步骤仅供参考,可根据实验试剂情况调整。


注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

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