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产品简介
RNAsolid组织RNA稳定保存液常用于采集动物组织时,仅需室温操作,即可迅速抑制RNase并稳定保存组织样品中的RNA。本产品使用范围广,不仅可广泛用于新鲜动物组织样品如肝脏、脑、肺、脾脏、肾脏、心脏、肌肉等,同时也可用于RNA病毒、培养细胞、真菌、细菌、血液以及某些植物样品的保存,更加适合样品收集后不能够立即进行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情况,特别适用于野外或临床采集的样品、大批量采集的动物组织样品和不能立即冻存样品的RNA稳定与保存。本产品的效果和液氮冻存的效果相当。本产品可以迅速渗透到组织内部,完全抑制内源性RNase活性,避免RNA降解,保持样本中RNA的完整性,并且和液氮一样可长期保存样品中的RNA。本产品安全便捷,无任何毒性和刺激性,可室温使用,确保了使用时的安全和便捷,与使用液氮相比,可有效避免因使用超低温的液氮而引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患,并且携带、运输非常方便。在本产品中样品的保存时间和存储温度相关,例如37℃可保存1~2天,室温25℃可保存一周,4℃可以保存1个月,-20℃或更低温度可以长期保存。
储存与运输
室温运输;室温保存,24个月有效。
组成
Component |
G3019-100ML |
G3019-1.2ML |
RNAsolid组织RNA稳定保存液 |
100 mL |
70×1.2 mL |
产品说明书 |
1份 |
操作流程
1. 样品处理
a) 动物组织:将组织剪切成合适大小后(建议组织块长宽高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolid组织RNA稳定保存液中。(注意:已浸入RNAsolid试剂中的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块,再重新放回RNAsolid试剂中;有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等,不适合用本品进行RNA保护。)
b) 植物组织:本品对于柔软的植物组织(如嫩叶,嫩茎)可直接渗透,且达到理想的RNA保护效果。将组织切成合适的大小(建议长宽高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolid组织RNA稳定保存液中。(注意:某些植物组织天生具有的屏障,如叶子表面的蜡层可阻碍RNAsolid试剂的渗透,对于此类组织,通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。)
c) 细胞等样本:收集细胞沉淀(用PBS清洗1-2次),之后迅速小心加入200-300 µL RNAsolid组织RNA稳定保存液,避免将细胞沉淀冲起,避免细胞重悬。
d) 酵母、细菌等样本:离心弃上清,收集一定量的菌体沉淀,然后迅速加入200-300 µL RNAsolid组织RNA稳定保存液完全浸没菌体沉淀。
e) 全血样本:收集100-300 µL新鲜的血液样品,加入含抗凝剂(EDTA钠盐、钾盐、肝素或柠檬酸盐等)的抗凝管中,颠倒混匀。按1:5的比例加入试剂,例如200 µL的血液加入1000 µL的RNAsolid组织RNA稳定保存液,颠倒混匀;对于血清或血浆也可按照1:5比例加入RNAsolid组织RNA稳定保存液保存。
f) RNA病毒等:对于拭子样品采集后,将拭子直接加入含有0.5-1 mL的RNAsolid组织RNA稳定保存液中进行保存;对于液体等样品采集后加入5-10倍体积的RNAsolid组织RNA稳定保存液,然后置于相应温度条件下保存。
2. 样品保存
加入有RNAsolid组织RNA稳定保存液的样本可在37℃保存1~2天,2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温(25℃)稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAsolid组织RNA稳定保存液中,4℃条件下可稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。如果需要将样品长期保存,先使保存在RNAsolid组织RNA稳定保存液中的样本于4℃浸透过夜,然后将再样本直接放入-20℃或-80℃,可长期稳定保存3~5年(为了后期加快解冻也可在放入-20℃或-80℃保存前将RNAsolid保护液吸出弃去)。
3. RNA提取
a) 组织样本:用洁净镊子从RNAsolid组织RNA稳定保存液中取出组织块,然后用干净的吸水纸吸掉表面液体。之后立即置于合适的裂解液中匀浆或液氮中进行研磨操作,后续即可采用Trizol或离心柱法等进行RNA提取操作。
b) 细胞、细菌类样本:对于细胞、细菌类样本尽量保持离心后的沉淀处于紧实状态,避免重悬,否则可能会对后续RNA得率有一定影响。在保存的样本中加入与RNAsolid组织RNA稳定保存液等体积的PBS或DEPC水,5000-10,000g离心1-5分钟收集沉淀样品,小心吸除上清液,后续即可采用Trizol或离心柱法进行RNA提取操作。
c) 全血、病毒类液体样本:参考后续使用RNA提取产品说明书进行操作。
注意事项
1. 实验中获得的组织样品适当处理大小后,应迅速并完全浸泡在RNAsolid组织RNA稳定保存液中。
2. 使用本产品在-20℃或-80℃冻存的样品,反复冻融3-5次不会显著影响RNA的质量。通常情况下,推荐把本产品保存的样品在室温或4℃运输或短期存放,-20℃或-80℃长期存放。如-20℃或-80℃长期存放,须先4℃存放过夜或更长时间后,才能转移到更低温度存放。
3. 本产品适用于新鲜动物组织样品或细胞中RNA的稳定与保存。样品冻存后再用RNAsolid保存的效果会比直接将新鲜样品用RNAsolid保存差很多。本产品尽管对于冻存的样品也有一定的稳定保存作用,但更适合新鲜样品。
4. 本产品保存的组织样品能用常规的RNA抽提方法进行RNA抽提,如Trizol法和离心柱法等,使用时直接将样品从RNAsolid试剂中取出当作常规的新鲜或冻存样品即可,少量残留的RNAsolid试剂不会影响后续提取效果。
5. 本产品也可用于组织中蛋白和DNA的保存,但RNAsolid会导致蛋白质变性,后续可进行Western Blot、SDS-PAGE等实验,而不适用于蛋白或酶功能活性测试等实验。样品从RNAsolid试剂中取出后可直接参考新鲜或冻存样品并按照常规方法进行蛋白提取。
6. 用本产品保存后,样品可能会变得微硬,为正常现象,不会影响后续RNA抽提时组织的匀浆、裂解等操作。
7. -20℃或-80℃保存情况下,样品解冻时RNAsolid试剂中可能有结晶析出,属正常现象,可待结晶完全溶解后使用,不会影响后续RNA的抽提效果。
8. 血液白细胞样品按照常规方法分离后,可以参考细胞样品的方法进行保存。
9. 用于植物样品保存时,应当去除表面蜡质,确保RNAsolid试剂能充分渗透进入组织内部。
10. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
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