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Hoechst 33258染液(即用型)

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货号:
KB210534
产品规格:
10ml
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产品详情 操作说明 注意事项

品简介

Hoechst 33258分子式为C25H24N6O·3HCl,分子量为533.88,CAS编号为23491-45-4,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,当与双链DNA大沟结合以后荧光显著增强。最大激发波长为346 nm,最大发射波长为460 nm。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测,细胞核染色,或常规的DNA染色。可用于固定细胞、组织或非固定细胞、组织的细胞核染色,染色后可用荧光显微镜观察,或流式细胞仪检测。荧光显微镜观察时用紫外光激发,为蓝色荧光。

本产品为即用型溶液,浓度经优化可满足各种常规染色的需要。


储存与运输

冰袋(wet ice)运输;4℃避光保存,有效期6个月。



操作步骤

1.对于固定的细胞或者组织切片:

a.对于固定的细胞或组织样品,固定后去除固定液,使用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次,每次3-5 min(如检测悬浮细胞,请按悬浮细胞常规操作方式进行,实验均需添加离心等步骤);

b.(可选步骤)如需对固定的细胞或者组织进行免疫荧光染色等处理,则优先进行相关处理,处理后再进行Hoechst 33258染色;

c.直接取适量本产品Hoechst 33258染液(即用型)覆盖样品,室温避光孵育5 min左右;

d.去除染液,用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次,每次3-5 min;

e.封片后或者直接置于荧光显微镜下观察,激发波长为350 nm,发射波长为460 nm。

2.对于活细胞或者培养组织:

a.细胞培养物中加入适量本产品Hoechst 33258染液(即用型),充分覆盖待染色的样品;通常六孔板一个孔中需加入1 mL染色液,96孔板一个孔中需加入100 μL染色液;于37℃培养箱中,孵育10-20 min;

      b.去除染液,用PBS或者其他合适的缓冲液洗涤2-3次,每次3-5 min;

      c.直接于荧光显微镜下观察,激发波长为350 nm,发射波长为460 nm。


注意事项

1. 荧光染料都存在荧光淬灭的问题,建议染色后尽快完成拍照。为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片剂。

2. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。

本产品仅供科研用途,不用于临床诊断!

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