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产品详情
操作说明
注意事项
产品简介
鬼笔环肽是由鬼笔鹅膏真菌(Amanita phalloides)产生的一种环肽，可与F肌动蛋白结合，使F肌动蛋白保持稳定。TRITC荧光物质标记的鬼笔环肽可特异的与真核细胞的F-actin结合，从而显示微丝骨架在细胞中的分布。
本产品为荧光染料TRITC标记的鬼笔环肽，TRITC发射波长570-573 nm，可用于细胞或组织的微丝荧光检测，经染色后细胞骨架呈红色荧光。本产品使用时推荐的稀释比为1:300-1:500。按照每张片子需要200 μL染色工作液，本产品可用于70-120张片子的染色。
储存与运输
冰袋(wet ice)运输；-20℃避光保存，有效期12个月。
使用方法
1. 经甲醛固定的细胞爬片或组织切片，PBS洗涤，稍甩干后用组化笔画圈使组织或细胞位于圆圈中央。
2. 向圆圈内滴加含0.1% Triton X-100的PBS或破膜液完全覆盖组织，室温孵育10 min，PBS洗3次，每次5 min。
3. 将本产品用PBS按照1:300-1:500稀释，配制成鬼笔环肽染色工作液。向圆圈内滴加鬼笔环肽染色工作液完全覆盖组织，室温避光染色60-120 min，PBS清洗切片3次。
4. (可选做)向组织上滴加DAPI染色试剂染细胞核8-10 min，以PBS清洗切片3次。
5. 切片稍甩干后，滴加抗荧光淬灭封片剂封片，荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察。
注：自备固定液、PBS、破膜液、DAPI染色液、抗荧光淬灭封片剂等。
注意事项
1. 荧光染料都存在淬灭的问题，操作时注意避光。染色工作液现配现用，尽快使用，不可长期保存。
2. 甲醇可以破坏actin蛋白，因此样本前期固定不能使用含有甲醇的固定液。
3. 鬼笔环肽通常不具有细胞通透性，极少用于活细胞染色。
4. 操作时请穿实验服，并佩戴一次性手套。
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
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