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RNA提取液

优惠价 688.00
价格 ¥0.00
货号:
M0k942143
产品规格:
100ml
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产品详情 操作说明 注意事项

产品信息

产品名称

产品编号

规格

RNA提取液

M0k942143

100 mL



产品简介

本产品RNA提取液是一种用于细胞或组织总RNA提取的试剂,利用异硫氰酸胍等物质迅速裂解细胞,使RNA释放并萃取至苯酚中,同时内含RNase抑制剂,防止RNA降解,保持RNA的完整性。



储存与运输

冰袋(wet ice)运输;4℃避光保存,有效期12个月。



组成

Component

G3013-100ML

RNA提取液

100 mL

说明书

1份



使用说明

自备LF、异丙醇、DEPC水、75%乙醇(DEPC水配制)。

1. 细胞或组织样本裂解

贴壁细胞:去除细胞培养液,用适量预冷PBS清洗细胞,尽量将PBS吸除干净。按照6孔板每孔加1 mL RNA提取液,12孔板每孔加0.5 mL RNA提取液的用量向孔板中加入RNA提取液,轻轻晃动使板底细胞充分接触RNA提取液,移液枪吹打细胞,使细胞裂解,然后转移至离心管中,室温静置5 min。

悬浮细胞:离心收集细胞,尽量将上清液吸除干净,每1-10×106个细胞加入1 mLRNA提取液,移液枪吹打数次使细胞裂解,室温静置5 min。

组织样本:组织剪切成小块,放入预冷的匀浆器内,每100 mg组织加入1 mL RNA提取液,匀浆至无可见组织块。4℃,12000 g离心10 min使组织碎片分离,转移上清至新的离心管中。

2. RNA抽提:每1 mL RNA提取液加380 μLLF,涡旋混匀或离心管上下颠倒剧烈晃动15 s,室温静置3 min。

3. 离心:4℃,12000 g离心15 min,小心转移上层无色水相至新的离心管中,每毫升提取液大约可吸取500-550 μL。

4. 沉淀RNA:向上述收集的水相提取物管中加入550 μL异丙醇,轻轻颠倒混匀数次,-20℃沉淀15 min。

5. 离心:4℃,12000 g离心10 min,在管底可见白色沉淀即为总RNA,弃上清。

6. 洗涤:加入1 mL 75%乙醇,颠倒混匀。4℃,12000 g离心5 min,弃上清,再高速短暂离心(5000 g离心3-5 s),用微量吸头小心吸尽液体。

7. RNA溶解:将有RNA沉淀的离心管开口静置3-5 min,待RNA略晾干后,加入20 μL DEPC水使RNA充分溶解,即可用于浓度检测及后续实验,不能及时进行后续实验时需将RNA置于-70℃保存。注意不可让RNA过分干燥,否则很难溶解,且会影响A260/280比值。

注意事项

1. 所有枪头和离心管均需无RNA酶污染,可购买本公司无菌无酶耗材。

2. 本试剂含异硫氰酸胍和重蒸酚,避免接触皮肤或吸入。

3. 操作时请穿实验服,并佩戴一次性手套。


产品仅供科研用途,不用于临床诊断!


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