服务热线
400-1016-218
联系方式
- 手机：400-1016-218
- Q Q：355185756
- 邮箱：355185756@qq.com
- 地址：安徽省合肥市高新区黄山路602号合肥国家大学科技园A401室
产品详情
操作说明
注意事项
产品描述
本试剂盒提供了简单而又快速的8% SDS-PAGE高分辨彩色(红色)凝胶配制试剂，能够同时制备下层胶(即分离胶)和上层胶(也称浓缩胶、积成胶)，用户只需准备制胶设备，即可快速制备蛋白凝胶。试剂盒中上层胶溶液中含有红色染料，使得蛋白点样孔清晰呈现，实现了加样过程的可视化，极大的提高了加样效率。凝胶可200 V恒压电泳，仅需30 min即可完成电泳过程，相较于传统的凝胶电泳体系耗时更短，且分辨率更高。
本方法配制时无需自行添加TEMED，仅需AP（过硫酸铵）即可形成凝胶，大大减少了TEMED对人体和环境的危害。本产品为改良型Bis-Tris配方凝胶，25×电泳缓冲液为MOPS电泳缓冲液，不能使用Tris-Glycine电泳缓冲液。具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；
4℃避光保存，其中BTT电泳缓冲液（25×）可室温保存，12个月有效。
操作步骤
1. 根据目的蛋白分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶（分离胶），参照表格如下
|
丙烯酰胺浓度 |
最佳分离范围 |
|
8% |
≥35 kDa |
|
10% |
10-250 kDa |
|
12% |
10-100 kDa |
2. 配制10% AP溶液：称取AP（过硫酸铵）粉末0.1 g，用1 mL水完全溶解。该溶液4℃存贮1-2周有效，-20℃保存3个月有效；
3. 跟据实验需求，等比例混合对应的溶液A和B，加入适量的10% AP溶液，分别配制下层胶溶液、上层胶溶液。不同规格以及不同厚度的玻璃板可以等比例调整上层胶和下层胶溶液的配制体积，以常用规格8.3 cm×7.3 cm凝胶板为例，推荐配制体系如下表格：
|
配制组别 |
组分 |
单块凝胶(1.0 mm厚度) |
两块凝胶(1.0 mm厚度) |
|
下层胶溶液 |
8% BTT下层胶溶液A |
2.5 mL |
5 mL |
|
8% BTT下层胶溶液B |
2.5 mL |
5 mL |
|
|
10% AP |
100 μL |
200 μL |
|
|
上层胶溶液 |
BTT上层胶溶液A |
1 mL |
2 mL |
|
BTT上层胶溶液B(红色) |
1 mL |
2 mL |
|
|
10% AP |
40 μL |
80 μL |
4. 装配好凝胶制具，先加入配制好的下层胶溶液，并立即缓慢均匀的加入配制好的上层胶溶液（也可使用蒸馏水封住下层胶液面，待下层胶凝固充分后再加入配制好的上层胶溶液，约15-30 min），插入梳子，待其凝固（约15-30 min左右）后即可使用；
5. 配制完成的凝胶如不能当天使用，可4℃保存1-2天后使用；
6. 电泳前将BTT电泳缓冲液（25×）稀释成1×电泳缓冲液即可（电泳缓冲液不建议重复使用超过2次）；
7. 电泳时可全程200 V恒压电泳，一般30分钟左右即可完成电泳。
注意事项
1. 预混液中存在单体丙烯酰胺，对人体有害，操作时请注意做好防护措施。
2. 为了保证样本同时进入分离胶，直接灌制上层胶时需缓慢均匀的加入配制好的上层胶溶液。
3. 加入AP之后尽快灌制凝胶，请勿长时间放置。
4. 如需进一步加快凝胶速度，可增加0.5倍10% AP使用量。
5. 胶的凝固与温度有显著的正相关性。同等条件下，温度越高，凝固速度越快。
6. 本公司同时提供其他彩色（绿色、黄色、蓝色）上层胶溶液，以区别不同样本不同凝胶电泳。
7. 本试剂盒制成的凝胶不能兼容Tris-Glycine电泳缓冲体系，只能与套装内BTT电泳缓冲液配套使用，另提供BTT电泳缓冲液（25×）单品。
凡合肥万物生物科技有限公司销售的产品均有严格的质量保证。如发现产品存在包装规格疑问，请于收货之日起七日内向我公司总部或当地办事处提出，并请保证该产品，以备本公司进行核对检验。如果发现有质量问题，请于收货后一月内保留产品50%以上的量，以便本公司回收产品进行质检，确认产品质量。如逾期，则视为已经对本公司产品进行验收。 声明：如发生产品索赔事宜，本公司仅在产品价格范围内酌情赔偿，恕不接受超出产品价格范围之赔偿。客户在使用过程中有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话我们随时给予解答。
合肥万物生物科技有限公司
客服热线：400-1016-218
QQ：355185756
地址：安徽省合肥市高新区黄山路602号合肥国家大学科技园A401室