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产品简介
Cell Counting Kit-8,简称CCK-8(或CCK8)试剂盒,是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测试剂盒。其检测原理在于,在电子耦合试剂存在的情况下,检测试剂中的WST-8化合物被活细胞内脱氢酶还原成具有水溶性的橙黄色甲臜化合物,该物质在450 nm处有最大吸收峰。甲臜量与活细胞数成正比,即细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。本试剂盒中WST-8对细胞无明显毒性,可以用于外源细胞因子等诱导的细胞增殖检测,以及药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测,是MTT检测方法的升级版。
本试剂盒使用便捷,无需配制或稀释,无需收集或洗涤细胞,无需对甲臜化合物进行再次溶解,对贴壁细胞及悬浮细胞均适用。且酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
储存与运输
冰袋(wet ice)避光运输;避光保存,4℃保存12个月有效;也可-20℃保存,24个月有效。
操作步骤
1. 细胞处理:细胞以合适密度种板,如是贴壁细胞需待贴壁良好。根据实验需要进行加药、转染等处理;
2. 显色:按照每100 μL细胞培养液加入10 μL CCK-8溶液比例加入试剂,在细胞培养箱内孵育2 h;
3. 检测:在酶标仪中于450 nm波长处测定吸光度。
注意事项
1. 本试剂盒检测原理是依赖于脱氢酶催化的反应,样品中如有较多还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,需设法去除。
2. 加检测试剂时避免产生气泡,否则会干扰检测结果。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品仅供科研用途,不用于临床诊断!
合肥万物生物科技有限公司
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